Le micro kit d’ARNm Dynabeads™ mRNA DIRECT™ est conçu pour l’isolement simple et rapide d’ARNm polyadénylé (polyA) pur et intact. Ce kit isole l’ARNm hautement purifié et intact directement à partir d’échantillons de cellules, de tissus et d’ARN total.
• Obtenez de l’ARNm extrêmement pur en 15 minutes environ
• Intégrez des étapes de purification d’ARN total et d’enrichissement de l’ARNm
• Effectuez une transcription inverse et une amplification par PCR directement sur la microbille
• Utilisez une préparation de bibliothèque de transcriptomes entiers avec le kit de séquences d’ARN total Ion v2.0
Isolement rapide de l’ARNm à haute pureté directement à partir d’échantillons
Le kit de purification d’ARNm Dynabeads™ Direct contient des microbilles magnétiques pour l’isolement du transcriptome de l’ARNm à partir d’une grande variété d’échantillons. L’isolement d’ARNm intact est possible grâce à des inhibiteurs d’ARNase dans le tampon de lyse / liaison, en association avec des étapes d’hybridation et de nettoyage strictes. L’ARN ribosomal et les petites molécules d’ARN (ARN de transfert, micro-ARN, petit ARN nucléolaire et petit ARN cytoplasmique) ne se lient pas aux microbilles et sont éliminés de la préparation. Seules les espèces d’ARN polyadénylé (ARNm) sont capturées, ce qui entraîne des préparations plus propres et des résultats plus sensibles. En quelques minutes, l’ARNm pur est isolé et prêt à être utilisé dans les applications en aval.
Une procédure d’enrichissement simple
Le microkit de purification d’ARNm Dynabeads™ DIRECT™ utilise un principe de purification par affinité solide pour l’enrichissement de l’ARNm polyadénylé. Les Dynabeads™ superparamagnétiques, couplées à de l’oligo-(dT)25, sont d’abord équilibrées avec un tampon de lyse / liaison, puis mélangées à un lysat de cellules ou de tissus afin de lier l’ARNm. Les microbilles sont ensuite nettoyées pour enlever les espèces d’ARN contaminantes, puis l’ARNm est élué dans une quantité infime (5 µl) de Tris-HCl 10 mM. L’ensemble du processus est facilité par l’utilisation d’un aimant en néodyme (vendu séparément), qui permet une immobilisation rapide et efficace des microbilles magnétiques pendant les modifications de tampon.
Conçu pour une gamme étendue de types d’échantillons
Tout échantillon biologique d’origine vertébrée, invertébrée, végétale, fongique ou bactérienne peut être utilisé avec le kit de purification d’ARNm DIRECT™ Dynabeads™. Le kit est également idéal pour extraire de l’ARNm et de l’ARN polyadénylé viral à partir de sang, de sérum et d’expectorations. Les préparations d’acides nucléiques, y compris les échantillons d’ARN total et d’acides nucléiques non fractionnés, ainsi que les tissus fixés à la formaline et enrobés de paraffine (FFPE), peuvent également être extraits à l’aide du kit de purification d’ARNm Dynabeads™ DIRECT™.
L’ARN est adapté à toutes les applications moléculaires en aval, y compris :
• Séquençage de l’ARN
• Clonage génétique
• Synthèse d’ADNc, construction de bibliothèques d’ADNc
• RT-PCR, RT-PCR quantitative
• RPA : dosage de protection de la ribonucléase
• Hybridation soustractive
• Hybridation points / fentes
• Extension d’amorce
Pour la recherche uniquement. Non utilisé à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.
